Elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd met als doel moleculen te scheiden op basis van hun grootte en elektrische lading, zodat de diagnose van ziekten kan worden gesteld, eiwitexpressie kan worden geverifieerd of micro-organismen kunnen worden geïdentificeerd.
Elektroforese is een eenvoudige en goedkope procedure die wordt gebruikt in laboratoriumroutines en in onderzoeksprojecten. Volgens het doel van elektroforese kan het nodig zijn om andere tests en onderzoeken uit te voeren om bijvoorbeeld een diagnose te stellen.
Waar is het voor
Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd, zowel in onderzoeksprojecten als bij diagnose, aangezien het een eenvoudige en goedkope techniek is. Zo kan elektroforese worden uitgevoerd om:
- Identificeer virussen, schimmels, bacteriën en parasieten, waarbij deze toepassing vaker voorkomt in onderzoeksprojecten;
- Vaderschapstest;
- Controleer de expressie van eiwitten;
- Identificeer mutaties, die bijvoorbeeld bruikbaar zijn bij de diagnose van leukemieën;
- Analyseer de soorten circulerend hemoglobine, die nuttig zijn bij de diagnose van sikkelcelanemie;
- Beoordeel de hoeveelheid eiwitten die in het bloed aanwezig zijn.
Volgens het doel van elektroforese kan het nodig zijn om andere aanvullende tests uit te voeren zodat de arts de diagnose kan voltooien.
Hoe het is gedaan
Om de elektroforese uit te voeren, is het nodig de gel, die polyacrylamide of agarose kan zijn, afhankelijk van het doel, elektroforesebuffer en vat, molecuulgewichtsmarkering en een fluorescerende kleurstof, naast een UV- of LED-lichtapparatuur, ook bekend als een transilluminator.
Na het bereiden van de gel moet een specifiek voorwerp worden geplaatst om de putjes in de gel te maken, in de volksmond de kam genoemd, en de gel te laten uitharden. Als de gel klaar is, breng je de stoffen gewoon aan in de putjes. Hiervoor moet een molecuulgewichtsmarker in een van de putjes worden geplaatst, een positieve controle, dat wil zeggen de stof waarvan bekend is wat het is, een negatieve controle, die de geldigheid van de reactie garandeert, en de te analyseren monsters. Alle monsters moeten worden gemengd met een fluorescerende kleurstof, omdat het op deze manier mogelijk is om de banden op de transilluminator te visualiseren.
De gel met de monsters moet in het elektroforesevat worden geplaatst, dat de specifieke bufferoplossing bevat, en vervolgens wordt het apparaat ingeschakeld zodat er elektrische stroom is en bijgevolg een potentiaalverschil, wat belangrijk is voor de scheiding van de deeltjes volgens aan hun lading en grootte. De elektroforetische looptijd is afhankelijk van het doel van de procedure en kan tot 1 uur duren.
Na de vastgestelde tijd is het mogelijk om het resultaat van de elektroforetische doorloop door de transilluminator te bekijken. Wanneer de gel onder UV- of LED-licht wordt geplaatst, is het mogelijk om het bandpatroon te visualiseren: hoe groter het molecuul, hoe minder het migreert, dichter bij de put komt, en hoe lichter het molecuul, hoe groter het migratiepotentieel.
Om de reactie te valideren, is het noodzakelijk dat de banden van de positieve controle worden gevisualiseerd en dat bij de negatieve controle niets wordt gevisualiseerd, anders is het indicatief dat er sprake was van besmetting en moet het hele proces worden herhaald.
Soorten elektroforese
Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd en afhankelijk van het doel kunnen verschillende soorten gel worden gebruikt, waarvan polyacrylamide en agarose de meest voorkomende zijn.
Elektroforese om micro-organismen te identificeren komt vaker voor in onderzoekslaboratoria, maar voor diagnostische doeleinden kan elektroforese worden gebruikt om hematologische ziekten en ziekten te identificeren die evolueren met de toename van de hoeveelheid eiwitten, wat de belangrijkste soorten elektroforese zijn:
1. Hemoglobine-elektroforese
Hemoglobine-elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd om de verschillende soorten hemoglobine die in het bloed circuleren te identificeren, waardoor de aanwezigheid van ziekten die verband houden met de hemoglobinesynthese kan worden vastgesteld. Het type hemoglobine wordt geïdentificeerd door middel van elektroforese bij een specifieke pH, idealiter tussen 8,0 en 9,0, waarbij een patroon van banden wordt geverifieerd dat kan worden vergeleken met het normale patroon, waardoor de aanwezigheid van abnormale hemoglobines kan worden geïdentificeerd.
Waar wordt het voor gedaan: Hemoglobine-elektroforese wordt gedaan om ziekten die verband houden met hemoglobinesynthese, zoals sikkelcelanemie en hemoglobine C-ziekte, te onderzoeken en te diagnosticeren, naast dat het nuttig is bij het differentiëren van thalassemie. Leer hoe u hemoglobine-elektroforese interpreteert.
2. Eiwitelektroforese
Eiwitelektroforese is een onderzoek dat door de arts wordt aangevraagd om de hoeveelheid eiwitten die in het bloed circuleren te beoordelen en zo ziekten te identificeren. Deze test wordt gedaan aan de hand van een bloedmonster dat wordt gecentrifugeerd om het plasma te verkrijgen, het deel van het bloed dat onder meer bestaat uit eiwitten.
Na elektroforese kan een patroon van banden worden gevisualiseerd en vervolgens een grafiek waarin de hoeveelheid van elke fractie van eiwitten wordt aangegeven, wat fundamenteel is voor de diagnose.
Waar wordt het voor gedaan: Eiwitelektroforese stelt de arts in staat het optreden van multipel myeloom, uitdroging, cirrose, ontsteking, leverziekte, pancreatitis, lupus en hypertensie te onderzoeken volgens het bandenpatroon en de grafiek die in het onderzoeksrapport wordt gepresenteerd.
Begrijp hoe het wordt gedaan en hoe u het resultaat van eiwitelektroforese kunt begrijpen.
Hielp deze informatie u?
Ja nee
Jouw mening is belangrijk! Schrijf hier hoe we onze tekst kunnen verbeteren:
Nog vragen? Klik hier om te worden beantwoord.
E-mail waarop u een antwoord wilt ontvangen:
Controleer de bevestigingsmail die we u hebben gestuurd.
Uw naam:
Reden van bezoek:
--- Kies uw reden --- Ziekte Leef beter Een andere persoon helpen Kennis opdoen
Bent u een gezondheidswerker?
NeeArtsFarmaceutischVerpleegsterVoedingsdeskundigeBiomedischFysiotherapeutSchoonheidsspecialistOverig
Bibliografie
- ENCYCLOPEDIA BIOSFEER, KENNEND WETENSCHAPPELIJK CENTRUM. Elektroforese: concepten en toepassingen2015. Beschikbaar op :. Betreden op 24 september 2019
- KASVI. Wat is elektroforese en waarom is het belangrijk?Beschikbaar in: . Betreden op 24 september 2019
